الملخص

يعتبر نظام توصيل الأدوية للعين أمراً بالغ الأهمية وصعباً للغاية، ،حيث تظهر الأشكال الصيدلانية ‫التقليدية مثل المحاليل والمعلقات وقت مكوث قصير في الموقع قبل القرنية و توافر حيوي ضعيف  ‫بسبب دفاعات العين الطبيعية مثل الرمش والإدماع وتصريف الأجسام الغريبة بما فيها الأدوية، ولهذه الأسباب فقط 5% من الجرعة الأصلية تصل إلى الهدف. في هذا البحث تم تحضير قطرات عينية من الليفوفلوكساسين تتهلّم بمجرد تطبيقها داخل العين نتيجة اختلاف درجة الحرارة بين الوسط الخارجي والعين، وتم اعتماد الطريقة الباردة لتحضير هذه المحاليل، وباستخدام بلمرات مختلفة مثل بولوكسامير 407 بلمراً متهلّماً باختلاف درجة الحرارة، ألجينات الصوديوم بلمراً متهلماً بوجود بعض الشوارد مثل الكالسيوم، هيدروكسي بروبيل ميثيل السيللوز (HPMC) بلمراً لصوقاً بالمخاط، بولي ايثيلين غليكول 6000 بلمراً مساهماً بتعديل درجة حرارة التهلم. الهدف الأساسي من صياغة هذه المستحضرات هو تعزيز التوافر الحيوي للدواء، والحصول على تأثير مستدام لتحرر الدواء و بالتالي زيادة مطاوعة المريض. قيمت الخصائص الفيزيائية والكيميائية للمحاليل المتهلمة في الموضع الناتجة في نقاء المظهر، موحودية المحتوى، قيمة باهاء الصيغة، لزوجة المحلول، درجة حرارة التهلم، القدرة على تشكيل هلامة، وأجريت دراسات التحرر في الزجاج باستخدام أكياس التحال، ودرست التآثرات بين المادة الدوائية والسواغات باستخدام المسح الطيفي بواسطة تحويل فورييه في طيف الأشعة تحت الحمراء والمسح الحراري التفاضلي، وتم تقييم تأثير تركيز المتماثر المتهلم في الموضع على معدل تحرر المادة الدوائية. وبالنتيجة كانت جميع الصيغ نقية، شفافة وبلون أصفر فاتح، وكانت قيم باهاء الصيغ المحضرة ملائمة كي لا تسبب تخريشاُ للعين، وحصلنا على خصائص فيزيائية تناسب الإيتاء العيني لمثل هذه الأشكال. أعطت الصيغ p8 وp7 وp4 تحرراً مستداماً للدواء، فحررت معظم محتواها بعد 8 و10 ساعات، وأظهرت نتائج المسح الطيفي بواسطة تحويل فورييه في طيف الأشعة تحت الحمراء والمسح الحراري التفاضلي أنه لم تحدث تآثرات بين المادة الدوائية والبلمرات المستخدمة.

---

كلمات مفتاحية : التهلم في الموضع، ليفوفلوكساسين، الطريقة الباردة، البلمرات الحساسة للحرارة، البلمرات اللصوقة بالمخاط، In-Situ Gel, Levofloxacin, Cold Method, Temperature Sensitive Polymers, Mucoadhesive polymers

---

المقدمة 

تعرف الأشكال العينية المتهلمة في الموضع بأنها عبارة عن محاليل بوليمرية حساسة للتغيرات المحيطة في العين مثل درجة الباهاء ودرجة الحرارة ووجود بعض الكهارل، تكون بشكل سائل قبل إعطائها للمريض وبمجرد التماس مع العين تخضع لعملية التهلم في الموضع (تشكل هلامة). تمثل قطرات العين التقليدية 90% من الأشكال العينية الصيدلانية المتاحة تجارياً بسبب سهولة الإعطاء ومطاوعة المريض ولكنها تبدي الكثير من المشاكل مثل وقت مكوث قصير مع القرنية بسبب دفاعات العين الطبيعية مثل الرمش، والإدماع، والتصريف الدمعي الأنفي، مما يؤدي إلى قلة التوافر الحيوي (أقل من 5%)، بالأضافة إلى الحاجة للتقطير بانتظام وبشكل متكرر في وقت قصير وبالتالي قلة مطاوعة المريض وتسبب رؤية ضبابية وعدم القدرة على الحصول على تحرر مستدام للدواء.[1،2] يوجد العديد من المقالات المنشورة عن استخدام الأنظمة الدوائية المعتمدة على التهلم في الموضع لزيادة التوافر الحيوي للدواء والحصول على تحرر مضبوط للدواء مثل: Timolol maleate، Ciprofloxacin ، Azythromycin . قام Kamel-EL وزملاؤه بتطوير تركيبات تعتمد على Poloxamer 407، لتعزيز التوافر الحيوي للعين لمادة تيمولول ماليات. وتمت إضافة عوامل تعزيز اللزوجة مثل ميثيل السيللوز (MC)، هيدروكسي بروبيل ميثيل السيللوز (HPMC)، وكربوكسي ميثيل السيل لوز (CMC) لتقليل تركيز407 poloxamer. كشفت نتائج الدراسة في الجسم الحي أن التوافر الحيوي للتيمولول ماليات قد زاد بمقدار 2.5 ضعفاً. يهدف هذا البحث إلى صياغة قطرات عينية بشكل هلامة من الليفوفلوكساسين باستخدام بلمرات مختلفة للتغلب على المشاكل المرتبطة بقطرات العين التقليدية وبالتالي زيادة فترة التماس مع العين للحصول على تحرر مستدام للدواء وزيادة التوافر الحيوي، إضافة إلى تقييم الصيغ المحضرة لخصائصها الفيزيوكيميائية والميكانيكية ومن ثم تحديد الصيغ التي تحقق الهدف والأثر المطلوب.

المواد والطرائق 

المواد

• ليفوفلوكساسين هيميهيدرات (levofloxacin hemihydrate) من (Medichem SA, Spain)
• هيدروكسي بروبيل ميثيل سيللوز (cellulose methyl hydroxypropyl) من(,HEADChandong HEAD Company LTD China)
• بولوكسامير 407 من (SIGMA life Science, UK)
• بولي ايث لين غليكول 6000 (6000 glycol ethylene poly) من (SUSHANT Industries, India)
• ألجينات الصوديوم (sodium alginate) من (Sigma-Aldrich, Germany)
• كلوريد الصوديوم (sodium chloride) من (scharlab S.L, Spain)
• بنزالكونيوم كلوريد (Benzalkonium chloridede) من (Sigma-Aldrich, Germany)

الأجهرة

• جهاز مقياس الطيف الضوئي بالأشعة فوق البنفسجية (UK 80+,T Instruments PG)
• جهاز الكشف بالأشعة تحت الحمراء (Germany FTIR -10049361IR Bruker)
• جهاز المسح الحراري التفاضلي (France131, DSC SETARAM)
• ميزان حساس -weighting Sartorius) (Germany 153,AZ-Goettingen,
• جهاز قياس قيمة باهاء الوسط (Hanna, Romania Instruments pH 211)
• مغناطيسي محرك مع كهربائي سخان (DLAB MS7-H550-S, China)
• مقياس اللزوجة (Myr viscotic vr 3000, spain)
• جهاز تقطير الماء تقطير (Fine Tech, SAWS-1004, Korea)
• أكياس تحال Dialysis bag
• جهاز الأمواج فوق الصوتية (Digital ultrasonic cleaner, Italy)
• فرن تجفيف (Carbolite PF30, German)

الطرائق

تحديد طول موجة الامتصاص الأعظمي لليفوفلوكساسين هيميهيدرات في محلول السائل الدمعي (pH 7.4) وتحضير المحلول العياري: تم مسح المادة الفعالة لليفوفلوكساسين بواسطة جهاز مقياس الطيف الضوئي في المجال المرئي وفوق البنفسجي، ضمن مجال 200-400 نانومتر وذلك باستخدام محلول محاكي للسائل الدمعي من أجل تحديد طول موجة الامتصاص الأعظمي ʎmax. للتحقق من خطية طريقة استخدام مقياس طيف الأشعة فوق البنفسجية لقياس تركيز الليفوفلوكساسين في وسط الانحلال المستخدم تم تحضير سلسلة عيارية من المادة الفعالة حيث تم اختيار محلول محاكي للسائل الدمعي ذو قيمة باهاء 7.4 = pH، كمحل مناسب لتحضير السلسلة العيارية وذلك استناداً إلى ما قام به Maharin Indri وزملاؤه.[3] تم تحضير المحلول من 0.200 غ من بيكربونات الصوديوم Bicarbonate Sodium، 0.670 غ من كلوريد الصوديوم Chloride Sodium، 0.008 غ من كلوريد الكالسيوم Chloride Calcium، و100 غ من الماء المقطر. تحضير الصيغ باستخدام بولوكسامير 407 عاملاً متهلماً في الموضع حساساً للحرارة:

أولاً: تم تحضير محلول المادة الدوائية حيث أذيبت كمية الدواء (500 ملغ) ضمن 40 مل من الماء المقطر باستخدام الأمواج فوق الصوتية لمدة 30 د حتى تمام الانحلال، ثم أضيف كل من البولي ايثيلين غليكول 6000، والبنزالكونيوم كلوريد كمادة حافظة و كلوريد الصوديوم كمعادل للضغط الحلولي إلى محلول المادة الدوائية بالاستعانة بالمحرك المغناطيسي (rpm 300) بدرجة حرارة الغرفة لمدة 15 د حتى تمام الانحلال.

ثانياً: تحضير محلول البولوكسامير 407 و محلول الهيدروكسي بروبيل ميثيل السيللوز، ثم بعثرة البولوكسامير 407 ضمن 20 مل من الماء المقطر البارد وترك المحلول الناتج في البراد بدرجة حرارة 4 درجة مئوية طوال الليل (24 ساعة)، كما بعثرت كمية الهيروكسي بروبيل ميثيل السيللوز ضمن 20 مل من الماء المقطر بالاستعانة بالمحرك المغناطيسي (rpm 300) لمدة يوم كامل (24 ساعة)، وفي الصيغ الحاوية على ألجينات الصوديوم تمت بعثرته ضمن 10 مل من الماء المقطر بالاستعانة بالمحرك المغناطيسي (rpm 300) لمدة ساعة ثم تتم إضافته إلى محلول الـ HPMC ويترك المحلول على المحرك المغناطيسي لمدة (24 ساعة).

ثالثاً: تم إضافة محلول البوبوكسامير407 إلى محلول بلمرات الـ HPMC وألجينات الصوديوم مع الاستمرار بالتحريك على المحرك المغناطيسي بدرجة حرارة الغرفة، ثم تتم إضافة محلول المادة الدوائية إلى المزيج الناتج وتم إكمال الحجم النهائي إلى 100 مل بالماء المقطر للحصول على الصيغة النهائية مع الاستمرار بالتحريك على المحرك المغناطيسي (rpm 300) لمدة 30 د حتى تمام التجانس.

الجدول (1): صيغ الهلامات العينية المحضرة باستخدام بولوكسامير 407
المادة	P1	P2	P3	P4	P5	P6	P7	P8
Levofloxacin (%w/v)	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
Poloxamer 40 (%w/v)	14	16	18	20	14	16	18	20
HPMC k-100 (%w/v)	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
PEG 6000 (%w/v)	1	1	1.5	1.5	1	1	1.5	1.5
Sodium Alginate (%w/v)	–	–	–	–	0.5	0.5	0.5	0.5
Sodium chloride (%w/v)	0.9	0.9	0.9	0.9	0.9	0.9	0.9	0.9
Benzalkonium chloride (%w/v)	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
Distilled water (mL) QS	100	100	100	100	100	100	100	100

 

 

 

 

تقييم الصيغ المحضرة من ناحية:

نقاء المظهر وتقييم الهلامات بصريأ من ناحية المظهر واللون:

قيم نقاء الصيغ المحضرة بوضعها على خلفية بيضاء وخلفية سوداء وفحصها بصرياً.

القدرة على تشكيل هلامة:[4]

تم قياس القدرة على تشكيل هلامة من خلال إضافة قطرة من الصيغ المحضرة إلى فيال يحوي 2 مل من محلول محاكي للسائل الدمعي بدرجة حرارة 35 درجة مئوية ويلاحظ بصرياً الوقت المستغرق لتشكيل هلامة. حيث تم إعطاء الإشارة + عندما تتشكل الهلامة خلال عدة ثواني وتستمر لـ 10-2 د. والإشارة ++ عندما تتشكل الهلامة مباشرة وتستمر لـ 1-4 ساعة. والإشارة +++ عندما تتشكل الهلامة مباشرة وتستمر لأكثر من 8 ساعات.

قيمة باهاء pH الصيغة:[5]

بشكل عام، لكي تتحمل العين المنتجات الصيدلانية العينية بشكل جيد، يجب أن تكون قيمة الباهاء للمنتجات المصنعة ضمن نطاق راحة العين الطبيعي pH من 6.5 إلى 7.5.

قيست الصيغ المحضرة بجهاز قياس قيمة الباهاء، بدرجة حرارة 25 درجة مئوية.

محتوى الصيغ المحضرة من المادة الفعالة:[6]

أخذ 1 مل من كل صيغة محضرة (التي يفترض أن تكون نظرياً 500 ملغ/100 مل)، ومدد ضمن بالون معايرة بسعة 100 مل حتى خط العيار بالماء المقطر مع المزج بالخض، ثم أخذ 1 مل من المحلول التانج و مدد ضمن بالون معايرة سعة 10 مل حتى خط العيار ليصبح التركيز الناتج نظرياً 5 مكغ/مل، بعد ذلك رشح المحلول الناتج باستخدام مرشحة Micrometer 0.45، وقيس امتصاص كل عينة من عينات الصيغ الناتجة على جهاز مقياس الطيف الضوئي r بطول موجة 288 نم، مقابل المحلول المحاكي للسائل الدمعي كشاهد، و تم تعويض الامتصاص بمعادلة الخط البياني الناتجة من دراسة خطية المادة الفعالة لحساب التركيز العملي، مع الأخذ بالحسبان إجراء ثلاث مكررات لكل تجربة وحساب المتوسط الحسابي والانحراف المعياري.

قياس اللزوجة:[7]

أجري فحص اللزوجة على عينات بحجم 50 مل من الصيغ المحضرة كلها، موضوعة ضمن بياشر زجاجية، وذلك بواسطة جهاز قياس لزوجة دوراني، طريقة بروكفيلد (Brookfield method) عند درجة حرارة 20 درجة مئوية، أي بطورها السائل و ذلك لأخذ فكرة عن قابلية إعطائها عبر العين بسهولة قبل تحولها لهلام في الموضع، وأخذت الشروط المناسبة للصيغ من نمط المغزل spindle R4، وسرعة الدوران rpm 100، يعبر عن قيمة اللزوجة بواحدة السانتيبواز Cp، تكرر القراءة ثلاث مرات ويؤخذ الوسطي مع حساب الانحراف المعياري (Mean±SD).

تحديد درجة حرارة التهلم:[8]

حددت درجة حرارة التهّلم، وهي درجة الحرارة التي تتحول عندها الصيغة من سائل إلى هلام Tsol-gel transition، حيث أُخذ 1 مل من كل صيغة محضرة بشكلها السائل وتم تمديدها مع محلول الدمع الصناعي بنسبة (40/7) (v/v)، ووضعت ضمن أنبوب اختبار سعة 10 مل، ثم وضع الأنبوب ضمن حمام مائي مثبّت بدرجة حرارة 15 درجة مئوية مع تثبيت الأنبوب بملقط، ورفعت درجة الحرارة بمقدار درجة واحدة في الدقيقة، وتُحدّد درجة حرارة التهلم (t1) بالدرجة التي لا تنساب بها الصيغة المُحضّرة لدى قلب أنبوب الاختبار بزاوية 90 أو بزاوية 180 درجة، ثم يتم خفض درجة الحرارة تدريجيا ًوتُحدّد درجة الحرارة التي يعود بها المحلول للتدفق (2t)، يتم أخذ متوسط درجتي الحرارة مع إجراء التجربة ثلاث مرات لكل صيغة وحساب المتوسط الحسابي والانحراف المعياري (Mean±SD).

دراسة تحرر المادة الدوائية من الصيغ المتهلمة في الموضع _في الزجاج _ باستخدام أكياس التحال:

تم استخدام أكياس التحال, وهي عبارة عن غشاء نصف نفوذ من أسيتات السيللوز لدراسة تحرر الليفوفلوكساسين من الصيغ العينية المتهلمة في الموضع في المخبر:

خطوات العمل:

• تحضير الحمام المائي بدرجة حرارة 35±2 درجة مئوية.
• أخذ 1 مل من كل صيغة محضرة ووضعت ضمن كيس التحال المرطب مسبقاُ عن طريق نقعه ضمن محلول سائل الدمع الصنعي (7.4 pH) لمدة 24 ساعة.
• يتم إحكام إغالق كيس التحال باستخدام الملاقط.
• وضع كيس التحال ضمن 100 مل من محلول الدمع الصنعي المحضر حديثا ًضمن بيشر زجاجي.
• وضع مغناطيس ضمن البيشر الزجاجي لضمان تجانس الوسط ومنع تشكل طبقة مركزة من محلول الدواء حول كيس التحال ليحاكي بذلك الظروف السريرية الحيوية.
• يحدد زمن بدء الدراسة العملية، و تسحب عينة 1 مل من البيشر الزجاجي بفواصل زمنية محددة (وهي 10 فواصل زمنية: 1،2،3،4،5،6،7،8،9،10 ساعة) مع مراعاة تعويض الحجم المسحوب مباشرة بمحلول الدمع الصنعي (7.4 pH) في كل مرة للحفاظ على الحجم.
• تحديد النسبة المئوية المتحررة عن طريق قياس الامتصاص عند طول موجة 288 نم، باستخدام مقياس الطيف الضوئي بعد إجراء التمديدات المناسبة، مقابل محلول الدمع الصنعي (7.4 = pH) شاهداً.

دراسة التآثرات بين المادة الدوائية والبلمرات المستخدمة في الدراسة:

المسح الطيفي بالأشعة تحت الحمراء Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR):

أجري المسح الطيفي بالأشعة تحت الحمراء لكل من المادة الدوائية النقية، كل بلمر على حدة ولمزائج الليفوفلوكساسين هيميهيدرات مع بلمرات 407 Poloxamer، 100K HPMC، Sodium Alginate، PEG 6000 باستخدام جهاز ALPHA BRUKER.

المسح الحراري التفاضلي Differential Scanning Calorimetry (DSC):

أجري المسح الحراري التفاضلي، باستخدام جهاز DSC131، SETARAM، (France) لدراسة السلوك الحراري لليفوفلوكساسين هيميهدرات النقي (Poloxamer 407، HPMC K100، Sodium Alginate، PEG 6000) ولمزائج الليفوفلوكساسين مع هذه البلمرات وأخذت عينات بوزن 5 ملغ ووضعت ضمن حجرة من الألمنيوم تحت جو من النتروجين مقابل حجرة ألمنيوم أخرى استخدمت شاهداً، ورفعت الحرارة من (10-400) درجة مئوية بمعدل  10 درجات في الدقيقة.

النتائج والمناقشة 

نتائج تحديد طول موجة الامتصاص الأعظمي لليفوفلوكساسين:

بعد إجراء مسح طيفي للمحلول المحضر من مادة الليفوفلوكساسين ضمن مجال 400 – 200 نم, سجلت قمة للمادة عند طول موجة 288 نم. الشكل (1)

نتائج السلسة العيارية لليفوفلوكساسين (الخطيةLinearity):

يبين الشكل (2) العلاقة الخطية بين قيم التراكيز والامتصاصات المقابلة لها بمعامل ارتباط أعلى من 0.9995 في الوسط المستخدم، مما يبين أن طريقة المقايسة السابقة خطية ويمكن اعتماد المعادلة المستحصلة في الخطوات اللاحقة للبحث.

نتائج تقييم الصيغ المحضرة:

نتائج دراسة نقاء المظهر وتقييم الهالمات بصريأ من ناحية المظهر واللون:

كل الصيغ المحضرة كانت: نقية، شفافة وبلون أصفر فاتح.

نتائج دراسة القدرة على تشكيل هلامة:

يبين الجدول (2) نتائج دراسة القدرة على تشكيل هلامة، حيث أظهرت الصيغ p4 وp7 وp8 أفضل قدرة على تشكيل هلامة حيث تم تشكيل هلامة مباشرة واستمرت لأكثر من 8 ساعات.

الجدول (2): نتائج القدرة على تشكيل هلامة
P1	+
P2	+
P3	++
P4	+++
P5	++
P6	++
P7	+++
P8	+++

 

 

نتائج دراسة قيمة باهاء pH الصيغة:

يبين الجدول (3) نتائج دراسة قيمة باهاء الصيغ المحضرة، فإن مجال القيم لجميع الصيغ المحضرة يتراوح ما بين 6.85 و7.22، وهذا يعني أن الصيغ ضمن مجال درجة الباهاء pH المقبول (6.5-7.5)، والذي لا يسبّب تخريشاً للعين.

الجدول (3): نتائج قيم باهاء الصيغ
قيم الباهاء	رمز الصيغة
6.85± 0.01	P1
6.92± 0.02	P2
6.95± 0.005	P3
7.04± 0.010	P4
7.07±0.011	P5
7.11± 0.015	P6
7.17± 0.011	P7
7.22± 0.005	P8

 

 

نتائج دراسة محتوى الصيغ المحضرة من المادة الفعالة:

يبين الجدول (4) نتائج المحتوى الفعلي من المادة الفعالة ضمن العينات المأخوذة من كل صيغة محضرة بثلاث تكرارات، علماً أن التركيز النظري بعد معالجة كل عينة مأخوذة يعادل 5 مكغ/مل. حيث تراوحت نتائج محتوى الصيغ المحضرة بين 97.64 و 103.49.

الجدول (4): نتائج محتوى الصيغ المحضرة من المادة الفعالة
رمز الصيغة	محتوى المادة الفعالة
P1	99.48±0.900
P2	99.67± 0.715
P3	103.49± 1.447
P4	101.34± 1.690
P5	97.64± 1.259
P6	98.72 ±1.353
P7	101.7± 1.489
P8	102.42± 1.613

 

 

نتائج دراسة لزوجة الصيغ المحضرة:

يبين الجدول (5) قيم لزوجة محاليل الصيغ المحضّرة، فقد تراوحت قيم اللزوجة بين 26.33 سنتيبواز للصيغة 1P و149.56 سنتيبواز للصيغة 8P. كما تبين أنّ زيادة تركيز المتماثر المتهلم في الموضع يؤدي إلى زيادة لزوجة محاليل الصيغ المحضرة. كما أن إضافة ألجينات الصوديوم بنسبة 0.5% أدت إلى زيادة لزوجة الصيغ المحضرة.

الجدول (5): نتائج لزوجة الصيغ المحضرة
رمز الصيغة	لزوجة الصيغ المحضرة Cp
P1	26.33±0.986
P2	59.13± 0.850
P3	94.53± 0.832
P4	122.9± 0.818
P5	59.65± 1.053
P6	89.36± 0.945
P7	120.366± 0.123
P8	149.56 ±1.150

 

 

 

نتائج دراسة تحديد درجة حرارة التهلم:

يبين الجدول (6) قيم درجات حرارة تهلم الصيغ المحضرة، فقد تراوحت بين القيمة 35.03 درجة مئوية للصيغة 8P و28.55 درجة مئوية للصيغة P1، حيث من الواضح أن درجة حرارة التحول من محلول إلى هلام تتناقص بازدياد تراكيز البلمرات المتهلّمة في الموضع، وهذا ما توافق مع Amir وزملائه. ولسطح العين درجة حرارة تعادل 35 درجة مئوية تقريباً وبالتالي يمكن لجميع الصيغ المحضرة أن تتهلم عند التطبيق في العين.

الجدول (6): قيم درجات حرارة تهلم الصيغ المحضرة
درجة حرارة التهلم C°	رمز الصيغة
35.03 ± 0.115	P1
34.1 ± 0.2	P2
32.46 ± 0.16	P3
30.63 ± 0.34	P4
33.73 ± 0.07	P5
32.35 ± 0.13	P6
30.25 ± 0.05	P7
28.55 ± 0.31	P8

 

 

 

نتائج دراسة تحرر المادة الدوائية من الصيغ المتهلمة في الزجاج:

أعطت جميع الصيغ المدروسة تحرراً بين 4 إلى 10 ساعات بحسب تركيز المتماثر المتهلم في الموضع. حررت الصيغتان P2 وP1 منخفضتا نسبة البولوكسامير 407 كامل محتواها من المادة الدوائية خلال مدة 4 ساعات و5 ساعات على الترتيب، وحررت الصيغة 3P كامل محتواها من المادة الدوائية خلال 6 ساعات، كما حررت الصيغة 4P الحاوية على أعلى نسبة من المتماثر المتهلم في الموضع (بولوكسامير 407) كامل محتواها من المادة الدوائية خالل 8 ساعات. حررت الصيغتان 6P وP5 منخفضتا نسبة البولوكسامير والحاوية على ألجينات الصوديوم بنسبة 0.5 % كامل محتواها من المادة الدوائية خالل مدة 5 ساعات و 6 ساعات على الترتيب، و حررت الصيغة 7P كامل محتواها من المادة الدوائية خالل 8 ساعات. كما حررت الصيغة 8P الحاوية على أعلى نسبة من المتماثر المتهلم في الموضوع بولوكسامير 407 بالإضافة إلى ألجينات الصوديوم كامل محتواها من المادة الدوائية خلال 10 ساعات. يبين الجدول (7) النسبة المئوية المتحررة مقابل الزمن لكل من الصيغ المدروسة:

الجدول (7): نتائج تحرر الليفوفلوكساسين
النسبة المئوية المتحررة مع الزمن %
الصيغة	1 سا	2 سا	3 سا	4 سا	5 سا	6 سا	7 سا	8 سا	9 سا	10 سا
P1	68.82±2.09	78.9±1.91	89.22±1.56	97.34±0.87	–	–	–	–	–	–
P2	49.68±1.92	76.81±2.26	84.70±1.45	89.45±1.59	96.76±1.59	–	–	–	–	–
P3	37.04±1.56	54.90±1.78	66.5±1.93	78.90±1.75	87.60±1.56	98.03±1.22	–	–	–	–
P4	29.51±1.31	42.84±1.84	55.02±1.25	67.08±1.06	75.54±1.39	87.95±1.06	94.55±1.56	98.5±1.04	–	–
P5	52.58±1.59	78.78±1.56	89.45±1.39	93.05±1.91	96.29±1.22	–	–	–	–	–
P6	41.45±1.25	54.90±1.78	68.47±1.56	76.10±1.42	85.4±1.06	96.06±1.04	–	–	–	–
P7	27.43±1.06	40.29±1.40	52.53±1.33	63.48±0.87	76.35±1.44	86.55±0.87	90.69±1.22	97.45±1.04	–	–
P8	23.02±1.25	34.03±1.22	43.31±1.40	50.84±1.51	61.28±1.04	72.18±1.22	78.09±1.22	83.08±1.06	92.70±1.40	98.45±0.89

 

 

وتوضح الأشكال (3) و(4) مخططات النسبة المئوية التراكمية المتحررة من الدواء %Q مقابل الزمن (Hours) من البلمرات المختلفة.

 

 

نتائج دراسة التآثرات بين البلمرات والمادة الدوائية:

يبين الشكل (5) طيف FTIR لليفوفلوكساسين النقي مع القمم الأساسية المميزة له، حيث نلاحظ وجود:

• قمتين عند الأعداد الموجية 3268 و 1048 عائدة إلى امتطاط مجموعة الكربوكسيل.
• قمة عند العدد الموجي 2848 عائدة إلى امتطاط مجموعة 3CH-Alkanes.
• قمة عند العدد الموجي 1620 عائدة إلى امتطاط الحلقات العطرية.
• قمة عند العدد الموجي 1725 عائدة إلى مجموعة O-C.
• قمة عند العدد الموجي 839 عائدة إلى امتطاط مجموعةF-C.[9]

 

 

تبين الأشكال (6، 7، 8، 9) نتائج المسح الطيفي بالأشعة تحت الحمراء لمزائج الليفوفلوكساسين مع بلمرات البلوكسامير407، هيدروكسي بروبيل ميثيل السيللوز HPMC، بولي ايثيلين غليكول PEG 6000، ألجينات الصوديوم Sodium Alginate على الترتيب. حيث أظهرت نتائج المسح الطيفي بالأشعة تحت الحمراء عدم وجود اختالفات كبيرة بين طيف الليفوفلوكساسين النقي ومزائجه الفيزيائية مع البلمرات المستخدمة وحيث تمت المحافظة على العصابات الدالة على المجموعات الوظيفية الخاصة بالليفوفلوكساسين في مزائجه، وبالتالي عدم وجود تآثر كيميائي أو فيزيائي ما بين الليفوفلوكساسين والسواغات المستخدمة في هذا البحث.

 

 

نتائج المسح الحراري التفاضلي:

أظهر مخطط المسح الحراري التفاضلي لمادة الليفوفلوكساسين ثلاث قمم حادة ماصّة للحرارة، القمة الأولى عائدة إلى عملية بلمهة الليفوفلوكساسين هيميهيدرات والقمتين 225.37 و234.56 عائدتين إلى درجة انصهار كل من الشكل غاما وبيتا مما يدل على أن المادة ذات طبيعة بلورية. كما أظهر المخطط قمتين ناشرتين للحرارة عند كل من 319.53 و342.03 عائدتين إلى عملية بلورة الشكل عديم الشكل من الليفوفلوكساسين الذي نتج جزئياً عن بلمهة الليفوفلوكساسين، وذلك يتوافق مع Sally A وزملائها.[10] الشكل (10)

توضح الأشكال (11، 12، 13، 14) مخططات المسح الحراري التفاضلي للمزائج الفيزيائية لكل من LEVO + Na Alginate و LEVO + HPMC K-100 و LEVO + Poloxamer 407 و LEVO + PEG 6000 على الترتيب، حيث حافظت المزائج الفيزيائية على وجود قمة حادة ماصة للحرارة عائدة إلى المادة الدوائية مما يدل على قلة التآثرات بين الليفوفلوكساسين والسواغات المستخدمة. [10,11] بينما أظهرت مخططات المزائج الفيزيائية لكل من LEVO + Poloxamer 407 وLEVO + PEG 6000 انخفاضاً  في شدة القمة الماصة للحرارة وقد يعزى السبب إلى التأثير الممدد للسواغات.

الاستنتاجات 

استطاع البحث تحقيق الهدف الأساسي منه وهو صياغة شكل صيدلاني متهلم في الموضع، وهو نظام إيتاء عيني يتمتع بالعديد من المزايا مثل إطالة مدة التماس مع القرنية، إطالة تحرر الدواء وبالتالي تحسين الفعالية العلاجية وزيادة التوافر الحيوي. أثبتت جميع الصيغ المحضرة أنها ضمن قيمة باهاء مناسبة كي لا تسبب تخريشاً للعين، وكانت بلزوجة مناسبة قابلة للتقطير بسهولة ضمن العين لضمان سهولة الإعطاء وتجانس محتوى الصيغة من المادة الفعالة، إضافة إلى امتلاكها درجة حرارة تهلم مناسبة كي لا يحدث للصيغ الناتجة تسرب من العين. وتبين أن زيادة نسبة البلمر المتهلم في الموضع بولوكسامير 407 ، وإضافة البلمر المتهلم بوجود الشوارد ألجينات الصوديوم، تؤدي إلى زيادة لزوجة المحلول، وانخفاض درجة حرارة التهلم، وزيادة القدرة على تشكيل هلامة. أعطت جميع الصيغ تحرراً مستداماً للمادة الفعالة (الليفوفلوكساسين) يتاروح بين 6 و10 ساعات، عدا  الصيغ 1p، 2p، 3p منخفضتي نسبة البلمر المتهلم في الموضع بولوكسامير 407 Poloxamer حيث أعطت تحرراً لمدة أقل.

المراجع :

1. Zhu M, Wang J, Li N. A novel thermo-sensitive hydrogel-based on poly(N-isopropylacrylamide)/ hyaluronic acid of ketoconazole for ophthalmic delivery. Artif Cells Nanomed Biotechnol. 2017.
2. Bisht R, Mandal A, Jaiswal JK, Rupenthal ID. Nanocarrier mediated retinal drug delivery: overcoming ocular barriers to treat posterior eye diseases. WIREs Nanomed Nanobiotechnol. 2018.
3. Indri Maharini, Ronny Martien, Akhmad Kharis Nugroho, Supanji, Adhyatmika. Validation UV Spectrophotometric Method to Determine Entrapment Efficiency of Ocular Polymeric Nanoparticle Levofloxacin Hemihydrate. Research Journal of Pharmacy and Technology, 2021;14(10):5479-2.
4. Prasanth VV, Parambi DGT, Ranjan S, Formulation and evaluation of in situ ocular gel of levofloxacin, Journal of Drug Delivery and Therapeutics. 2017; 7(5):68-73.
5. Almutairy, K., Khafagy, E. S., & Abu Lila, A. S. (2023). Development of Carvedilol Nanoformulation-Loaded Poloxamer- Based In Situ Gel for the Management of Glaucoma. Gels (Basel,Switzerland), 9(12), 952.
6. Mandal, , Thimmasetty, M. K., Prabhushankar, G., & Geetha, M. (2012). Formulation and evaluation of an in-situ gel-forming ophthalmic formulation of moxifloxacin hydrochloride. International journal of pharmaceutical investigation, 2(2), 78-82.
7. Alsaida A., Zafar A., Yasir M., Alzarea S. I., Alqinyah M., & Khalid M., (2022). Development of Ciprofloxacin-Loaded Bilosomes In-Situ Gel for Ocular Delivery: Optimization, In-Vitro Characterization, Ex-Vivo Permeation, and Antimicrobial Study. Gels (Basel, Switzerland), 8, (11), 687.
8. Nirav Patel, Vaishali Thakkar, Viral Metalia, Lalji Baldaniya, Tejal Gandhi, Mukesh Gohel, Formulation and Development of ophthalmic in situ gel for the treatment ocular inflammation and infection using application of Quality by Design concept, Drug Development and Industrial Pharmacy: 2015.
9. Vaibhav Kulkarni1, Sagar Arekar et al, Design and Characterization of Polymeric Floating Microspheres of Levofloxacin Hemihydrate, Department of Quality Assurance, Maharashtra College of Pharmacy, Nilanga, S., India, November 2017.
10. Sally A El-Zahaby, A. et al., Design and evaluation of gastroretentive levofloxacin floating mini-tablets-in-capsule system for eradication of Helicobacter pylori. Saudi Pharmaceutical Journal (2014).
11. Vaibhav Kulkarni1, Sagar Arekar et al, Design and Characterization of Polymeric Floating Microspheres of Levofloxacin Hemihydrate, Department of Quality Assurance, Maharashtra College of Pharmacy, Nilanga, S., India, November 2017.